你确定你喝的水干净、安全吗？

水是生命之源，我们日常生活中处处离不开桶装水、矿泉水、生活饮用水等，那我们平时喝的水真的安全吗？每年市场监督管理局发布的抽检信息中显示，桶装水检测出的铜绿假单胞菌检出率较其他参数居高不下，这种微生物已经成为污染公共饮水的隐患，那么它到底是什么？如何检测它？对我们的生活有何危害？

一、什么是铜绿假单胞菌？

铜绿假单胞菌，又称绿脓杆菌（代谢中产生水溶性绿色色素，使该菌呈绿色），是一种重要的水源性致病菌，革兰氏阴性菌、好氧、呈长棒型的细菌，生长温度范围为25-42℃，因对营养要求不高，善于利用碳源与氮源，存在的重要条件是潮湿的环境，所以在生活环境中广泛存在。

二、如何检测铜绿假单胞菌？

我国最新饮用水标准GB 19298-2014《食品安全国家标准 包装饮用水》中规定5份检测样品中铜绿假单胞菌均不得检出。

备注：GB 8538-2016是2016年12月23日发布，2017年06月23日实施；GB 19298-2014是2014年12月24日发布，2015年05月24日实施；GB 8538更新后就不是GB/T 8538了。

1、操作步骤

水样过滤：

在100级的洁净工作台进行过滤，操作首先用无菌镊子夹取灭菌滤膜边缘部分,将粗糙面向上,贴放在已灭菌的滤床上,固定好滤器,将250mL水样或稀释液通过孔径0.45μm的滤膜过滤,然后将过滤后的滤膜贴在已制备好的CN琼脂平板上,平铺并避免在滤膜和培养基之间夹留着气泡

培养：

将平板倒置于36°C±1°C培养24h~48h,并防止干燥。

结果观察：

在培养20h~24h和40h~48h后观察滤膜上菌落的生长情况并计数。

2、可疑菌落形态

备注：

计数所有显蓝色或绿色(绿脓色素)疑似铜绿假单胞菌的菌落,并进行绿脓菌素确证性试验。

相对于GB/T8538-2008 版本，GB8538-2016版本增加了绿脓菌素试验，不再是平板上显示蓝色或绿色即可判定为铜绿假单胞菌。

3、绿脓菌素试验

取可疑菌落2个~3个,分别接种在绿脓菌素测定培养基上,置于36℃±1℃培养24h±2h,加入三氯甲烷3mL~5mL,充分振荡使培养物中的绿脓菌素溶解于三氯甲烷液内,待三氯甲烷提取液呈蓝色时,用吸管将三氯甲烷移到另一试管中并加入1mol/L的盐酸1mL左右,振荡后,静置片刻。如上层盐酸液内出现粉红色到紫红色时为阳性,表示被检物中有绿脓菌素存在。

4、产氨试验

将纯培养物接种到装有乙酰胺液体培养基的试管中,在36 ℃±1 ℃下培养20h~24h。然后向每支试管培养物加入1滴~2滴钠氏试剂,检查各试管的产氨情况,如表现出从深黄色到砖红色的颜色变化,则为阳性结果,否则为阴性。

5、氧化酶试验

试纸放于平皿中,用铂金丝接种环或玻璃棒,将适量的纯种培养物涂布在预备好的氧化酶试纸上,在10s内显深蓝紫色的视为阳性反应。

6、荧光试验

将上述呈红褐色的且氧化酶反应呈阳性的培养物接种于金氏B培养基上,于36℃±1℃恒温箱培养24h~5d。每天需取出在紫外灯下检查其是否产生荧光性,将5d内产生荧光的菌落记录为阳性。